Что выявляет ПЦР анализ?

Полимеразная цепная реакция – это усовершенствованный, современный метод в области диагностики всевозможных инфекций, патологий наследственного характера, вирусных заболеваний. ПЦР исследование основано на принципе амплификации (или удвоения): создание определенного количества копий из одиночного участка ДНК человека. Медицинская ПЦР диагностика — это быстрый и очень точный анализ, для проведения которого требуется крайне малое количество биологического вещества (крови, каловых масс, спермы, слюны, мочи, соскоба эпителиальных тканей пациента). Результаты будут получены даже в том случае, если в собранном материале обнаружится всего один вредоносный микроорганизм.

Молекулярная диагностика методом ПЦР широко используется в следующих областях:

1. определение генетических, онкологических отклонений, инфекций на ранних стадиях.
2. при проведении судебно-медицинской экспертизы (если в наличии крайне малое количество ДНК).
3. в генетике молекулярного уровня, ветеринарии, биологии и фармацевтике.
4. для установления отцовства и определения личности по анализу ДНК.

Для чего проводят диагностику

Анализ ПЦР выявляет инфекционные заболевания и всевозможные патологии почти со 100% достоверностью. Поэтому его назначают и в тех случаях, когда при диагностике возникли спорные моменты или некоторые сложности с определением конкретного типа возбудителя.

Обследование ПЦР применяют:

• для уточнения диагноза (повторной проверки) ВИЧ на ранней стадии заболевания, если при первичном анализе результат вызывал сомнения (например, у новорожденного, родители которого инфицированы);
• для выявления злокачественных новообразований или текущей коррекции схем лечения, которые были назначены ранее конкретному пациенту;
• в качестве метода обнаружения болезнетворных микроорганизмов, поражающих половые и мочевыводящие органы, если идентифицировать их другими способами не представляется возможным;
• с целью диагностирования и устранения наследственных патологий и отклонений;
• для проверки плода на предмет патологий (ДНК диагностика выполняется на отдельных клетках эмбриона);
• для определения степени совместимости органов и тканей перед операцией по трансплантации;
• для полной диагностики крови донора на предмет вредоносных организмов;
• для оценки эффективности и динамики антибиотикотерапии.

С помощью данного метода можно определить присутствие следующих инфекций:

1. связанных с наружными и внутренними половыми органами – гонорею, уреаплазмоз, хламидиоз, микоплазмоз, гарднереллез;
2. грибковую инфекцию – кандидоз;
3. туберкулез на любой стадии болезни;
4. гепатит типа A, B, C, G, вирус иммунодефицита;
5. рино- и аденовирусы;
6. холеру;
7. инфекционную краснуху;
8. вирусы онкогенного характера;
9. золотистый стафилококк;
10. папилломавирус человека;
11. патогенные разновидности кишечной палочки;
12. острый или хронический менингит.

Этот список далеко не полный, поэтому в современных клинических лабораториях используют анализ комплексного типа. Анализ ПЦР 12 (13, 14, 15 и пр.) — это исследования на комплекс инфекций (их будет, соответственно, 12, 13, 14 или 15).

Особенности проведения забора материала

В качестве материала для исследования ПЦР подходит любая жидкость биологического характера, выделения или ткани организма больного. Вид биоматериала и особенности его взятия будут зависеть от того, какую именно инфекцию или патологию нужно диагностировать. Для этого врач проанализирует все симптомы, присутствующие у человека.

• Для выполнения ПЦР на ВИЧ, гепатит или таксоплазмоз в клинической лаборатории берут венозную кровь.
• Анализ ПЦР на ИППП осуществляется посредством исследования забора выделений из внутренних половых органов, мазка из уретральной области, мочи (андроскрин).
• Для диагностики методом ПЦР на вирусы типа мононуклеоза, герпеса или цитомегаловируса биоматериалом служит моча или мазок из зева на инфекции.
• Забор жидкости из спинномозгового канала выполняется в случае необходимости анализа поражений, которые произошли в нервной системе пациента.
• Пульмонологическая диагностика использует скрининг плевральной жидкости и мокроты.
• Во время ПЦР анализа вероятных внутриутробных патологий и инфекций при беременности собирают фрагменты околоплодных вод или клетки плаценты.

Правила забора крови (плазмы)

Забор крови на ПЦР выполняют не раньше, чем через 3 часа после последнего приема пищи. Идеальным вариантом для точности анализа станет взятие материала натощак из локтевой вены. Врач должен использовать одноразовую иглу, а собранный материал поместить в специальную вакуумную пробирку. Порцию взятой крови в пробирку следует несколько раз перевернуть, чтобы она полностью смешалась с антикоагулянтом. Взятая таким образом кровь может храниться не более суток при соблюдении температурного режима от +2 до +8 °С. Образцы цельной крови запрещено замораживать.

Процедура забора мочи на ПЦР

Для данного анализа подходит только порция мочи, собранная после утреннего пробуждения. Подготовка пациента заключается в тщательной гигиенической обработке наружных половых органов. Затем следует вытереть их насухо и приготовить специальный (стерильный) контейнер. Такой можно найти в любом аптечном пункте. В контейнер не должна попасть вода или выделения из влагалища. Поэтому, если мочу берут у женщины, то во влагалище рекомендуется ввести тампон. Подготовка мужчин к ПЦР заключается еще и в исключении сексуальных контактов за 2-3 дня до сбора мочи. Необходимый объем жидкости – 20-30 мл. При температуре не выше +8 °С собранный материал можно хранить в течение суток, а при -20 °С – до 7 дней.

Процедура забора мокроты

Анализу подлежит мокрота, которая выделяется утром во время первого приступа кашля. Перед откашливанием пациент должен тщательно очистить поверхность зубов и прополоскать ротовую полость теплой кипяченой водой для удаления всех возможных остатков пищи. Мокроту собирают в стерильную емкость (контейнер). Если у человека насморк, то нужно следить, чтобы в емкость не попали выделения из носоглотки. При отрицательных температурах материал можно хранить в течение 7 дней, при комнатной – не более 6 часов.

Забор соскоба у женщин

Соскоб для анализа выполняется из трех разных зон: уретры, канала цервикального и заднего свода влагалища. Соскоб на ПЦР у женщин осуществляется с помощью ложки Фолькмана или зонда универсального. Если анализ берется зондом, то его рабочая зона с материалом отрезается специальным инструментом и помещается в стерильную (одноразовую) пробирку с раствором для консервации. В случае использования ложки ее рабочие поверхности ополаскиваются этим же консервирующим раствором, который уже находится в одноразовой пробирке. Максимальный термин хранения – 1 сутки. Перед забором материала для исследования женщине нужно отказаться от половых контактов и дождаться окончания менструации. Соскоб на ПЦР берется после прекращения курса антибиотикотерапии, иначе результат может быть ошибочным.

Процедура взятия мазка (соскоба) у мужчин

Соскоб у мужчин на различные инфекции берется из уретры или генитальных язв (если есть такая необходимость). Инструментом служит стандартный зонд, рабочая часть которого после отрезания помещается в стерильную емкость с раствором-консервантом. Биоматериал можно хранить в холодильнике не дольше 24 часов.

Забор слюны для анализа

Выполнение этой процедуры требует некоторой подготовки. Следует воздержаться от приема пищи за несколько часов до манипуляции. Непосредственно перед забором нужно прополоскать полость рта физиологическим раствором. Анализ слюны на инфекции выполняется после помещения ее в одноразовую пробирку. Для диагностики достаточно 3-5 мл выделений. Такой материал хранить нельзя, поэтому собранную слюну необходимо сразу доставить в лабораторию. Если у вас нет такой возможности, то биоматериал замораживается.
На основе проверки данных типов материала устанавливается диагноз и назначается лечение пациента.

Средняя стоимость в Инвитро каждого анализа может колебаться в зависимости от типа биоматериала, способа его взятия, сложности определения возбудителя, вида исследования (количественный анализ или качественный).

Расшифровка результатов исследования

Для каждого пациента результаты анализа ПЦР могут быть положительными («+») или отрицательными («-»). Достоверность ответа будет зависеть от квалификации медперсонала клиники, правильности взятия биоматериала и выполнения всех требований по подготовке.

Расшифровка качественного анализа выглядит так:

1. Отрицательный анализ говорит о том, что в изученном материале не обнаружено присутствие возбудителей определенной инфекции. Это норма для здорового человека.
2. Положительный ответ означает, что в собранном биологическом образце были выявлены патогенные бактерии или вирусы. Пациенту требуется срочное лечение.

Нередко бывают случаи, что пациент получает положительный результат анализа, но при этом не чувствует никаких признаков или симптомов заболевания. Это не ложноположительный результат, а свидетельство того, что заболевание находится на ранней стадии. Будут назначены дополнительные анализы и исследования. Чем раньше пациент приступит к лечебной терапии, тем быстрее справится с недугом.

Существует еще и количественная диагностика. Ее используют для конкретного типа инфекции. На основании результатов врач сможет оценить степень заражения, стадию заболевания и выбрать наиболее эффективное лечение.

Преимущества метода ПЦР

В современной медицине существует много видов диагностики биологического материала. Но почему гинекология, онкология и другие медицинские направления чаще всего прибегают именно к ПЦР исследованию? Все дело в его многочисленных преимуществах. К ним относят высокую точность полученного результата: выявить инфекцию можно даже при наличии всего нескольких молекул патологических вирусов в собранном материале. Диагностика выполняется быстро, вы сможете получить ответ уже на следующий день. Методика не дает ложноположительных результатов, а для ее осуществления можно взять практически любой биологический образец из организма человека.