Кольцевая проба Геллера помогает проанализировать белковую составляющую мочи. Данный метод, разработанный Иосифом Геллером, базируется на физико-химическом процессе слипания. Для мочи требуется определенное состояние: при исследовании нужен прозрачный образец, который обладает кислой реакцией.
Содержание статьи:
Реактивы
Для исследования используется концентрат азотной кислоты HNO3. Также под данный метод подойдет реактив Ларионовой. Чтоб изготовить его, подготавливается раствор хлористого натрия в концентрированном состоянии: двадцать пять миллиграмм соли добавляют в сто миллилитров воды.
Далее жидкость нагревают, при этом происходит полное растворение соли. После того, как раствор остывает, надосадочную составляющую удаляют и девяносто девять миллилитров объединяют с одним миллилитром концентрата HNO3. Его также можно заменить двумя миллилитрами концентрата хлористоводородной кислоты.
Алгоритм проведения
Для пробы Геллера потребуется пробирка, в которую помещается реактив в объеме от одного до двух миллилитров. Далее очень осторожно по стенке сосуда добавляется исследуемая моча в равной пропорции с реактивом. По прошествии трех минут взаимодействия присутствие белка проявится в виде мутной пограничной линии между мочой и реактивом. Это кольцо и является белковым денатуратом.
Ложный положительный эффект изучения может возникнуть в случае применения азотной кислоты, а также при большом количестве нуклеоальбуминов или же солей уратов. В первой ситуации кольцо растворяется, если слегка встряхнуть пробирку. Вторая ситуация предполагает наличие кольца, которое будет локализоваться немного выше разделяющей черты. Оно растворяется при повышении температуры жидкости. В некоторых случаях возникает кольцо коричневого окраса, это результат окисления урохрома азотной составляющей.
Сравнивая эффект от применения HNO3 и реактива Ларионовой, хочется отметить второй вариант как более точный. Он обладает рядом преимуществ:
- Реактив Ларионовой не дает при анализе пигментные кольца.
- Белковые кольца проявлены более четко, чем с использованием метода Геллера.
- Сохраняется азотная кислота.
- Реактив не так опасен и, оказываясь на ткани, не прожигает ее.
Минусы при использовании пробы
- Использование пробы Геллера — довольно сложный процесс, для которого требуется довольно много времени, а также концентрат азотной кислоты.
- Может возникать пигментное кольцо коричневого окраса, что препятствует выявлению белка.
- В материале, в котором есть соль мочевой кислоты, может образовываться белое кольцо, располагающееся значительно выше линии, которая разделяет жидкости.
- Также исследование способно давать ложные положительные результаты в случае большого количества мочевой кислоты.
Альтернатива
Быстрый и более простой способ определения белка в моче — с помощью специальной бумаги, которая является индикатором.
В этом варианте исследования в материал погружается бумажная полоска, которая содержит в себе особую пропитку, благодаря чему индикаторная бумага при контакте с мочой приобретает цвет в диапазоне от желтого к синему. Оттенок указывает концентрацию белка. Существует шкала, по которой можно сделать данное заключение.
Для того чтобы результат был максимально точным, следует придерживаться некоторых правил:
- рН материала должен находиться на отметке от 3,0 до 3,5. Большое количество щелочи даст ложный положительный результат, а в случае большого количества кислоты в моче – ложный отрицательный.
- Бумажный индикатор не должен контактировать с материалом больше положенного времени. Иначе результат будет необъективным.
- Также при слишком большом количестве слизи может быть ложный положительный результат.
- В зависимости от бумаги и ее производителя чувствительность индикатора может быть разной. Так что не следует полностью полагаться на данный тест в отношении содержания белка в моче.
- Суточная моча не может показать количество белка.
